Segala-galanya, mikroskop yang canggih dan dilengkapi dengan baik gagal menghasilkan imej yang sangat baik kerana penggunaan sumber cahaya yang salah, yang biasanya membawa kepada pencahayaan sampel yang tidak mencukupi. Apabila dioptimumkan, pencahayaan spesimen harus terang, bebas silau, dan merata tersebar dalam bidang pandangan.
Terdapat banyak sumber cahaya yang tersedia untuk menerangi mikroskop, baik untuk pemerhatian rutin dan fotomikrograf kritikal. Sumber cahaya yang paling biasa, kerana kos rendah dan jangka panjangnya, adalah lampu halogen tungsten 50 atau 100 watt seperti yang digambarkan di dasar gambarajah mikroskop dalam Rajah 1, yang juga memperincikan laluan optik dalam mikroskop cahaya moden yang tipikal. Dalam angka ini, lampu tungsten-halogen memancarkan spektrum cahaya berterusan yang berpusat pada 3200 K (apabila ditetapkan pada voltan lampu +9 volt), yang kemudiannya dilalui melalui lensa pemungut dan medan sebelum ditunjukkan ke dalam kondenser bahan dan ke spesimen. Imej membentuk sinar cahaya ditangkap oleh objektif mikroskop dan diluluskan sama ada ke dalam eyepieces atau diarahkan oleh beamsplitter ke salah satu daripada beberapa pelabuhan kamera. Sepanjang laluan optik mikroskop, pencahayaan diarahkan dan difokuskan melalui satu siri diafragma dan kanta ketika ia bergerak dari sumber untuk menerangi spesimen dan kemudian ke dalam eyepieces atau lampiran kamera. Penjajaran komponen optik mikroskop untuk mengoptimumkan pencahayaan dalam mikroskop moden dijalankan berikutan peraturan pencahayaanKöhler. Lebih terperinci tentang bagaimana kedua -dua mikroskop cahaya yang ditransmisikan dan dicerminkan diselaraskan untuk pencahayaan properköhlere yang dibincangkan di bahagian kami untuk menubuhkan mikroskop yang ditransferasi cahaya yang ditransfer. Laluan optik yang ditunjukkan di atas dalam Rajah 1 adalah tipikal untuk mikroskop cahaya yang dihantar dan melibatkan beberapa kanta, diafragma, cermin, dan beamsplitters untuk mengarahkan cahaya melalui mikroskop.
Lampu tungsten-halogen agak cerah dengan spektrum warna yang berpusat pada 3200 K (apabila ditetapkan pada kira-kira +9 volt), tetapi memerlukan penapis penukaran warna untuk menaikkan suhu warna mereka ke kesetaraan siang hari. Satu lagi sumber cahaya yang popular ialah lampu xenon 75 hingga 150 watt kerana kecerahan yang sangat tinggi dan kehidupan yang panjang, output yang relatif di seluruh spektrum visual, dan suhu warna yang menghampiri yang diperlukan oleh emulsi filem siang. Di mana intensiti cahaya yang sangat tinggi diperlukan, lampu timah-halida sering digunakan. Influorescemicroscopy, khusus untuk tujuan fotomikrograf kritikal, 100 watt atau 200 pembakar merkuri sering digunakan. Pada tahun -tahun dahulu, lampu arka karbon atau mentol zirkonium mungkin telah digunakan, tetapi sumber -sumber ini jarang dilihat hari ini. Untuk maklumat lanjut dan perbincangan terperinci mengenai spektrum lampu yang luas yang tersedia untuk pencahayaan mikroskop, lawati bahagian kami Sumber Onlight untuk mikroskopi dan photomicrography.
Penjajaran pencahayaan sumber melalui laluan optik dalam mikroskopi cahaya yang dicerminkan juga menjadi kebimbangan utama, khususnya berkenaan dengan metallography, pemeriksaan wafer semikonduktor, dan kemajuan baru yang luar biasa yang dibuat dalam mikroskopi pendarfluor. Mikroskop cahaya yang dicerminkan juga diterangi dengan pelbagai sumber cahaya (seperti yang dibincangkan di atas) dan boleh diselaraskan untuk prestasi optimum menggunakan pencahayaan Köhler. Ini dibincangkan dengan lebih terperinci dalam bahagian kami mengenai konfigurasi pencahayaanKöhler pencahayaan untuk mikroskopi cahaya yang dicerminkan. Laluan pencahayaan untuk mikroskopi cahaya yang dicerminkan juga merupakan topik beberapa tutorial Java interaktif termasuk yang dihubungkan terus di bawah.
Dalam buku yang sangat baiknya "Fotografi Melalui Mikroskop", John Delllyargues bahawa antara 80 dan 90 peratus daripada semua photomicrograph yang dikemukakan kepada pertandingan, pameran, dan penerbitan saintifik adalah mangsa optik yang tidak sejajar yang mengakibatkan pencahayaan sampel yang lemah. Ini adalah salah satu masalah yang paling biasa dengan mikroskopi dan photomicrography secara umum, dan pemeriksaan kejutan terhadap mikroskop pelajar di banyak makmal universiti akan mendedahkan banyak kondenser bahan yang diselaraskan dengan baik dan sumber pencahayaan. Kami mengesyaki bahawa penjajaran dan pelarasan yang salah bagi kedua -dua kondensor bahan dan diafragma medan, ke atas pelbagai objektif dalam mikroskop yang diberikan, adalah sumber kesilapan terbesar dalam fotomikrograf.
Keperluan untuk pencahayaan yang betul tidak dapat disesuaikan. Sering kali, mikroskop $ 25, 000 dikurangkan ke tahap pembesar tangan dengan pencahayaan dan penjajaran yang tidak betul, mengakibatkan photomicrographs yang dilampaui oleh yang diambil dengan mikroskop $ 2000 di bawah syarat -syarat yang optimum ofköhler. Di bahagian pendamping primer ini berurusan dengan teori pencahayaan köhler dan pelaksanaannya (kedua -dua fortransmittedandreflectedlight) kita membincangkan aspek kritikal konfigurasi mikroskop dan telah memasukkan pelbagai intertiviti
